Üks maailm üks võitlus
─Rahvusvaheline koostöö, et luua ülemaailmne ühise saatusega kogukond, mis reageerib COVID-19 pandeemia väljakutsele
Üle maailma levinud uudne koroonaviirus on kaasa toonud jätkuva ülemaailmse COVID-19 pandeemia kriisi.Uuel koroonaviirusel pole piire, ükski riik ei jää sellest võitlusest COVID-19 vastu.Vastuseks sellele ülemaailmsele COVID-19 pandeemiale annab Liming Bio-Products Corp oma panuse meie ülemaailmsete kogukondade heaolu toetamiseks.
Meie maailm seisab praegu silmitsi uudse koroonaviiruse haiguse 2019 (COVID-19) pandeemia enneolematu mõjuga.Siiani ei ole selle haiguse raviks saadaval ühtegi tõhusat ravimit.Siiski on COVID-19 tuvastamiseks välja töötatud palju diagnostilisi teste.Need testid põhinevad molekulaarsetel või seroloogilistel meetoditel uudsete koroonaviirusespetsiifiliste nukleiinhapete või antikehade biomarkerite tuvastamiseks.Kuna COVID-19 on saavutanud pandeemilise staatuse, on uudse koroonaviiruse nakkuse varajane diagnoosimine viiruse leviku hindamisel ja selle ohjeldamisel kriitilise tähtsusega, kuid universaalseks kasutamiseks sobivat täiuslikku testi veel ei eksisteeri.Peame teadma, milliseid teste saaks potentsiaalselt kasutada COVID-19 nakkuse skriinimiseks, diagnoosimiseks ja jälgimiseks ning millised on nende piirangud.On väga oluline, kuidas neid teaduslikke vahendeid paremini kasutada ning aidata tuvastada ja kontrollida selle kiiresti leviva ja raske haiguse teket.
Uue koroonaviiruse tuvastamise eesmärk on teha kindlaks, kas COVID-19 nakatunud isik või asümptootiline kandja, kes võib viirust vaikselt levitada, anda olulist teavet kliinilise ravi otsuste tegemisel.Varasemad uuringud on näidanud, et 70% kliinilistest otsustest sõltuvad testimise tulemustest.Erinevate tuvastamismeetodite kasutamisel on ka nõuded tuvastamisreaktiivide komplektidele erinevad.
Joonis 1
Joonis 1:Diagramm, mis näitab üldiste biomarkerite taseme põhietappe COVID-19 nakkuse tüüpilise aja jooksul.X-telg näitab nakatumise päevade arvu ja Y-telg viiruskoormust, antigeenide kontsentratsiooni ja antikehade kontsentratsiooni erinevatel perioodidel.Antikeha viitab IgM ja IgG antikehadele.Nii RT-PCR-i kui ka antigeeni tuvastamist kasutatakse uudse koroonaviiruse olemasolu või puudumise tuvastamiseks, mis on otsene tõend patsiendi varajaseks avastamiseks.Nädala jooksul pärast viirusnakkust on eelistatud PCR või antigeeni tuvastamine.Pärast uudset koroonaviirusnakkust umbes 7 päeva jooksul on uudse koroonaviiruse vastane IgM-antikeha patsiendi veres järk-järgult suurenenud, kuid selle olemasolu kestus on lühike ja selle kontsentratsioon väheneb kiiresti.Seevastu viirusevastane IgG antikeha ilmub hiljem, tavaliselt umbes 14 päeva pärast viirusnakkust.IgG kontsentratsioon tõuseb järk-järgult ja püsib veres pikka aega.Seega, kui patsiendi veres tuvastatakse IgM, tähendab see, et viirus on hiljuti nakatunud, mis on varajane infektsiooni marker.Kui patsiendi veres tuvastatakse IgG antikeha, tähendab see, et viirusnakkus on olnud juba mõnda aega.Seda nimetatakse ka hiliseks infektsiooniks või varasemaks infektsiooniks.Seda täheldatakse sageli patsientidel, kes on taastumisfaasis.
Uue koroonaviiruse biomarkerid
Uus koroonaviirus on RNA-viirus, mis koosneb valkudest ja nukleiinhapetest.Viirus tungib peremeesorganismi (inimese) kehasse, siseneb rakkudesse läbi seondumiskoha vastava retseptori ACE2 ja paljuneb peremeesrakkudes, pannes inimese immuunsüsteemi reageerima võõrastele sissetungijatele ja tootma spetsiifilisi antikehi.Seetõttu saab pudelis olevaid nukleiinhappeid ja antigeene ning spetsiifilisi uudse koroonaviiruse vastaseid antikehi teoreetiliselt kasutada spetsiifiliste biomarkeritena uudse koroonaviiruse tuvastamiseks.Nukleiinhapete tuvastamiseks kasutatakse kõige sagedamini RT-PCR tehnoloogiat, samas kui uute koronaviirusespetsiifiliste antikehade tuvastamiseks kasutatakse tavaliselt seroloogilisi meetodeid.Praegu on saadaval mitmesuguseid testimismeetodeid, mida saame COVID-19 nakkuse testimiseks valida [1].
Uue koroonaviiruse peamiste testimismeetodite põhiprintsiibid
Seni on saadaval palju COVID_19 diagnostilisi teste, iga päev saavad hädaolukorras kasutusloa alusel heakskiidu rohkem testikomplekte.Kuigi uued testiarendused tulevad välja nii paljude erinevate nimede ja vormingutega, põhinevad kõik praegused COVID_19 testid põhimõtteliselt kahel peamisel tehnoloogial: viiruse RNA nukleiinhapete tuvastamine ja seroloogilised immunoanalüüsid, mis tuvastavad viirusspetsiifilisi antikehi (IgM ja IgG).
01. Nukleiinhapete tuvastamine
Pöördtranskriptsiooni-polümeraasi ahelreaktsioon (RT-PCR), silmusvahendatud isotermiline amplifikatsioon (LAMP) ja järgmise põlvkonna sekveneerimine (NGS) on levinumad nukleiinhappemeetodid uudse koronaviiruse RNA tuvastamiseks.RT-PCR on esimest tüüpi COVID-19 test, mida soovitavad nii Maailma Terviseorganisatsioon (WHO) kui ka USA haiguste tõrje ja ennetamise keskus (CDC).
02.Seroloogiline antikehade tuvastamine
Antikeha on kaitsev valk, mis tekib inimkehas vastusena viirusinfektsioonile.IgM on varajast tüüpi antikeha, samas kui IgG on hilisemat tüüpi antikeha.Seerumi- või plasmaproovi uuritakse tavaliselt spetsiifiliste IgM- ja IgG-tüüpide antikehade olemasolu suhtes, et hinnata COVID-19 infektsiooni ägedat ja taastumisfaasi.Need antikehadel põhinevad tuvastamismeetodid hõlmavad kolloidkulla immunokromatograafiat, lateks- või fluorestseeruva mikrosfääri immunokromatograafiat, ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA) ja kemiluminestsentsanalüüsi.
03. Viiruse antigeeni tuvastamine
Antigeen on inimkeha poolt äratuntav viiruse struktuur, mis käivitab immuunkaitsesüsteemi, et toota antikehi, mis eemaldavad viiruse verest ja kudedest.Viirusel esinevat viiruse antigeeni saab sihtida ja tuvastada immuunanalüüsi abil.Sarnaselt viiruse RNA-ga esinevad viiruse antigeenid ka nakatunud inimeste hingamisteedes ja neid saab kasutada COVID-19 nakkuse ägeda faasi diagnoosimiseks.Seetõttu soovitatakse esmaseks antigeenianalüüsiks sageli koguda ülemiste hingamisteede proove, nagu sülg, ninaneelu ja orofarüngeaalsed tampoonid, sügava köha röga, bronhoalveolaarne loputusvedelik (BALF).
Uue koroonaviiruse testimismeetodite valimine
Testimismeetodi valimine hõlmab paljusid tegureid, sealhulgas kliiniline seade, testimise kvaliteedikontroll, tööaeg, testimiskulud, proovivõtumeetodid, laboripersonali tehnilised nõuded, nõuded rajatisele ja seadmetele.Nukleiinhapete või viirusantigeenide tuvastamine peab andma otseseid tõendeid viiruste esinemise kohta ja kinnitama uudse koroonaviiruse infektsiooni diagnoosi.Kuigi antigeenide tuvastamiseks on palju meetodeid, on nende uudse koroonaviiruse tuvastamise tundlikkus teoreetiliselt madalam kui RT-PCR amplifikatsioonil.Antikehade testimine on inimorganismis toodetud viirusevastaste antikehade tuvastamine, mis on ajas mahajäänud ja mida sageli ei saa viirusnakkuse ägedas faasis varajaseks avastamiseks kasutada.Avastamisrakenduste kliiniline seade võib olla erinev ja ka proovivõtukohad võivad olla erinevad.Viiruse nukleiinhapete ja antigeenide tuvastamiseks tuleb proov koguda hingamisteedest, kus viirus esineb, näiteks nina-neelu tampoonid, orofarüngeaalsed tampoonid, röga või bronhoalveolaarne loputusvedelik (BALF).Antikehapõhiseks tuvastamiseks tuleb koguda vereproov ja uurida spetsiifilise viirusevastase antikeha (IgM/IgG) olemasolu.Kuid antikehade ja nukleiinhapete testi tulemused võivad üksteist täiendada.Näiteks kui testitulemus on nukleiinhappenegatiivne, IgM-negatiivne, kuid IgG-positiivne, näitavad need tulemused, et patsient ei kanna praegu viirust, kuid on uudsest koroonaviiruse infektsioonist paranenud.[2]
Uute koroonaviiruse testide eelised ja puudused
Uue koroonaviiruse kopsupõletiku diagnoosimise ja ravi protokollis (prooviversioon 7) (avaldatud riikliku tervishoiukomisjoni ja traditsioonilise hiina meditsiini riikliku administratsiooni poolt 3. märtsil 2020) kasutatakse nukleiinhapete testimist uudse diagnoosimise kuldstandardmeetodina. koroonaviirusnakkus, samas kui antikehade testimist peetakse ka üheks diagnoosi kinnitusmeetodiks.
Patogeensed ja seroloogilised leiud
(1) Patogeensed leiud: RT-PCR- ja/või NGS-meetodite abil saab uudset koroonaviiruse nukleiinhapet tuvastada nina-neelu tampooniproovides, rögas, alumiste hingamisteede eritistes, veres, väljaheidetes ja muudes proovides.See on täpsem, kui proovid on võetud alumistest hingamisteedest (röga või õhuteede eemaldamine).Proovid tuleks esitada testimiseks võimalikult kiiresti pärast kogumist.
(2) Seroloogilised leiud: NCP viirusspetsiifiline IgM muutub tuvastatavaks umbes 3–5 päeva pärast tekkimist;IgG tiitrimine saavutab taastumise ajal vähemalt 4-kordse tõusu, võrreldes ägeda faasiga.
Testimismeetodite valik sõltub aga geograafilisest asukohast, meditsiinilistest eeskirjadest ja kliinilistest tingimustest.USA-s andis NIH välja Coronavirus Disease 2019 (COVID-19) ravijuhised (saiti värskendati 21. aprillil 2020) ja FDA andis välja poliitika koronaviirushaiguse diagnostiliste testide kohta 2019 rahvatervise hädaolukorra ajal (välja antud 16. märtsil 2020). ), milles IgM/IgG antikehade seroloogiline testimine valiti ainult skriiningtestiks.
Nukleiinhapete tuvastamise meetod
RT_PCR on ülitundlik nukleiinhappetest, mille eesmärk on tuvastada, kas uudne koronaviiruse RNA esineb hingamisteedes või muus proovis või mitte.Positiivne PCR-testi tulemus tähendab uudse koroonaviiruse RNA olemasolu proovis, mis kinnitab COVID-19 nakatumist.Negatiivne PCR-testi tulemus ei tähenda viirusnakkuse puudumist, sest seda võib mõjutada halb proovi kvaliteet või haiguse ajahetk taastumisfaasis jne.Kuigi RT-PCR on väga tundlik test, on sellel mitmeid puudusi.RT-PCR testid võivad olla töömahukad ja aeganõudvad ning sõltuvad oluliselt proovi kõrgest kvaliteedist.See võib olla väljakutse, kuna viiruse RNA kogus mitte ainult ei erine tohutult erinevate patsientide vahel, vaid võib varieeruda ka sama patsiendi sees, sõltuvalt proovi kogumise ajahetkest, samuti infektsioonifaasidest või kliiniliste sümptomite ilmnemisest.Uue koroonaviiruse tuvastamiseks on vaja kvaliteetseid proove, mis sisaldavad piisavas koguses puutumatut viiruse RNA-d.
RT-PCR test võib mõnele COVID-19 infektsiooni põdevale patsiendile anda vale negatiivse tulemuse (valenegatiivse).Nagu me teame, asuvad uudse koroonaviiruse peamised nakkuskohad kopsudes ja alumistes hingamisteedes, nagu alveoolid ja bronhid.Seetõttu peetakse sügavast köhast pärit rögaproovi või bronhoalveolaarset loputusvedelikku (BALF) viiruse tuvastamisel kõige tundlikumaks.Kliinilises praktikas kogutakse aga sageli proove ülemistest hingamisteedest, kasutades ninaneelu või orofarüngeaalseid tampooni.Nende proovide kogumine ei ole mitte ainult patsientidele ebamugav, vaid nõuab ka spetsiaalselt koolitatud personali.Proovide võtmise vähem invasiivseks või lihtsamaks muutmiseks võib mõnel juhul anda patsientidele suuõõne tampooni ja lubada neil võtta proov põse limaskestalt või võtta keeleproov.Ilma piisava viiruse RNA-ta võib RT-qPCR anda vale-negatiivse testitulemuse.Hiinas Hubei provintsis teatati RT-PCR tundlikkusest esialgsel tuvastamisel ainult umbes 30–50%, keskmiselt 40%.Valenegatiivsuse kõrge määr oli tõenäoliselt põhjustatud ebapiisavast proovivõtmisest.
Lisaks nõuab RT-PCR test kõrgelt koolitatud personali, et viia läbi keerulisi RNA ekstraheerimise etappe ja PCR amplifikatsiooni.See nõuab ka kõrgemat bioohutuse kaitset, spetsiaalset laboratoorset rajatist ja reaalajas PCR-seadet.Hiinas tuleb RT-PCR test COVID-19 tuvastamiseks läbi viia bioohutuse 2. taseme laborites (BSL-2), kus personali kaitsmiseks kasutatakse 3. bioohutuse taseme (BSL-3) tava.Nende nõuete kohaselt suutis Hiina Wuhani CDC labori võimsus 2020. aasta jaanuari algusest veebruari alguseni tuvastada vaid paarsada haigusjuhtu päevas.Tavaliselt ei oleks see teiste nakkushaiguste testimisel probleemiks.RT-PCR muutub aga kriitiliseks probleemiks globaalse pandeemia, nagu COVID-19, nagu COVID-19 puhul, mida testitakse potentsiaalselt miljoneid inimesi, kriitiliseks probleemiks, kuna see nõuab spetsiaalseid laborirajatisi või tehnilisi seadmeid.Need puudused võivad piirata RT-PCR kasutamist tõhusa sõeluuringu vahendina ning põhjustada ka viivitusi testimistulemuste aruannetes.
Seroloogiliste antikehade tuvastamise meetod
Haiguse edenedes, eriti keskmises ja hilises staadiumis, on antikehade tuvastamise määr väga kõrge.Wuhani lõunahaiglas läbi viidud uuring näitas, et antikehade tuvastamise määr võib COVID-19 nakatumise kolmandal nädalal ulatuda üle 90%.Samuti on antikeha uudse koronaviiruse vastase inimese immuunvastuse saadus.Antikehatestil on RT-PCR ees mitmeid eeliseid.Esiteks, seroloogiliste antikehade testid on lihtsad ja kiired.Antikehade külgvoolu teste saab kasutada hoolduspunktis, et anda tulemus 15 minutiga.Teiseks on seroloogilise testiga tuvastatud sihtmärk antikeha, mis on teadaolevalt palju stabiilsem kui viiruse RNA.Kogumise, transportimise, säilitamise ja testimise ajal on antikehade analüüside proovid üldiselt stabiilsemad kui RT-PCR proovid.Kolmandaks, kuna antikeha on vereringes ühtlaselt jaotunud, on proovide võtmisel vähem erinevusi võrreldes nukleiinhappetestiga.Antikehade testimiseks vajalik proovi maht on suhteliselt väike.Näiteks piisab antikeha külgvoolu testis kasutamiseks 10 mikroliitrist sõrmega torkitud verd.
Üldjuhul valitakse antikehatest nukleiinhapete tuvastamise lisavahendiks, et parandada uudse koroonaviiruse avastamise määra haiguse kulgude ajal.Kui antikehatesti kasutatakse koos nukleiinhappetestiga, võib see suurendada COVID19 diagnoosimise analüüsi täpsust, vähendades võimalikke valepositiivseid ja valenegatiivseid tulemusi.Praegune kasutusjuhend ei soovita kahte tüüpi testi eraldiseisva tuvastamise vorminguna kasutada, vaid seda tuleks kasutada kombineeritud vorminguna.[2]
Joonis 2:Nukleiinhapete ja antikehade testi tulemuste õige tõlgendamine uudse koroonaviiruse nakkuse tuvastamiseks
Joonis 3:Liming Bio-Products Co., Ltd. – uudne koronaviiruse IgM/IgG antikehade topeltkiirtesti komplekt (StrongStep®SARS-CoV-2 IgM/IgG antikehade kiirtest, lateksimmunokromatograafia)
Joonis 4:Liming Bio-Products Co., Ltd. – StrongStep®Uudne koroonaviiruse (SARS-CoV-2) Multiplex Real-Time PCR komplekt (kolme geeni tuvastamine, fluorestsentssondi meetod).
Märge:See ülitundlik, kasutusvalmis PCR-komplekt on pikaajaliseks säilitamiseks saadaval lüofiliseeritud vormingus (külmkuivatusprotsess).Komplekti saab transportida ja hoida toatemperatuuril ning see on stabiilne ühe aasta.Iga eelsegu tuub sisaldab kõiki PCR-i amplifikatsiooniks vajalikke reagente, sealhulgas pöördtranskriptaasi, Taq polümeraasi, praimereid, sonde ja dNTP-substraate. Kasutajad saavad segu lihtsalt lahustada, lisades koos malliga PCR-klassi vett ja seejärel laadida. amplifikatsiooni käivitamiseks PCR-seadmele.
Vastuseks uudsele koroonaviiruse puhangule on Liming Bio-Products Co., Ltd. töötanud kiiresti kahe diagnostikakomplekti väljatöötamise nimel, et võimaldada kliinilistel ja rahvatervise laboritel COVID-19 nakkust kiiresti diagnoosida.Need komplektid sobivad väga hästi laiaulatuslikuks sõeluuringuks riikides ja piirkondades, kus uudne koroonaviiruse puhang kiiresti levib, ning COVID-19 nakkuse diagnoosimiseks ja kinnitamiseks.Need komplektid on mõeldud kasutamiseks ainult eelnevalt teavitatud hädaolukorras kasutusloa (PEA) alusel.Katsetamine piirdub riiklike või kohalike ametiasutuste eeskirjade kohaselt sertifitseeritud laboritega.
Antigeeni tuvastamise meetod
1. Viiruse antigeeni tuvastamine on klassifitseeritud samasse otsese tuvastamise kategooriasse kui nukleiinhapete tuvastamine.Need otsesed avastamismeetodid otsivad proovis viiruspatogeenide tõendeid ja neid saab kasutada diagnoosi kinnitamiseks.Antigeenide tuvastamise komplektide väljatöötamiseks on aga vaja kõrge kvaliteediga monoklonaalseid antikehi, millel on tugev afiinsus ja kõrge tundlikkus, mis suudavad ära tunda ja püüda patogeenseid viirusi.Antigeeni tuvastamise komplekti valmistamiseks sobiva monoklonaalse antikeha valimine ja optimeerimine võtab tavaliselt rohkem kui kuus kuud.
2. Praegu on uudse koroonaviiruse otseseks tuvastamiseks mõeldud reaktiivid veel uurimis- ja arendusjärgus.Seetõttu pole ühtegi antigeeni tuvastamise komplekti kliiniliselt valideeritud ega kaubanduslikult saadaval.Kuigi varem teatati, et Shenzhenis asuv diagnostikafirma on välja töötanud antigeenide tuvastamise komplekti ja seda on Hispaanias kliiniliselt testitud, ei saanud analüüsi usaldusväärsust ja täpsust kontrollida reaktiivi kvaliteediprobleemide tõttu.Praeguseks ei ole NMPA (endine Hiina FDA) veel kliiniliseks kasutamiseks heaks kiitnud ühtegi antigeeni tuvastamise komplekti.Kokkuvõttes on välja töötatud mitmesuguseid tuvastamismeetodeid.Igal meetodil on oma eelised ja piirangud.Erinevate meetodite tulemusi saab kasutada kontrollimiseks ja täiendamiseks.
3. Kvaliteetse COVID-19 testikomplekti loomine sõltub suuresti optimeerimisest uurimis- ja arendustegevuse käigus.Liming Bio-Product Co., Ltd.testikomplektid peavad vastama rangetele tootmis- ja kvaliteedikontrollistandarditele, et tagada nende kõrgeim jõudlus ja järjepidevus.Liming Bio-Product Co., Ltd. teadlastel on üle kahekümne aasta kogemusi in vitro diagnostikakomplektide kavandamisel, testimisel ja optimeerimisel, et tagada analüütilise kvantifitseerimise kõrgeim tase.
COVID-19 pandeemia ajal seisis Hiina valitsus silmitsi tohutu nõudlusega epideemia ennetusmaterjalide järele rahvusvahelistes levialades.5. aprillil Riiginõukogu ühise ennetus- ja kontrollimehhanismi pressikonverentsil "Meditsiinimaterjalide kvaliteedijuhtimise tugevdamine ja turukorra reguleerimine" rääkis ministeeriumi väliskaubanduse osakonna esmatasandi inspektor Jiang Fan. Commerce ütles: "Järgmisena keskendume oma jõupingutustele kahele aspektile, esiteks, et kiirendada rahvusvahelise üldsuse jaoks vajalike meditsiinitarvete toetamist ning parandada toodete kvaliteedikontrolli, reguleerimist ja haldamist. Anname Hiina panuse ülemaailmsele epideemiale ühiselt reageerimisel ja inimkonna ühise tulevikuga kogukonna ülesehitamisel.
Joonis 5:Liming Bio-Products Co., Ltd. uudne koroonaviiruse reaktiiv on saanud EL CE registreerimistunnistuse
Aukiri
Houshenshan
Joonis 6. Liming Bio-Products Co., Ltd. toetas Wuhan Vulcani (HouShenShan) mägihaiglat võitluses COVID-19 epideemiaga ja talle anti Wuhani Punase Risti autunnistus.Wuhan Vulcani mägihaigla on Hiina kuulsaim haigla, mis on spetsialiseerunud raskete COVID-19 patsientide ravile.
Kuna uudne koroonaviiruse puhang levib üle maailma, toetab Nanjing Liming Bio-Products Co., Ltd. oma uuenduslike tehnoloogiatega kogukondi kogu maailmas ja aitab selle enneolematu ülemaailmse ohuga võidelda.COVID-19 nakkuse kiirtestimine on selle ohuga võitlemise oluline osa.Anname jätkuvalt märkimisväärse panuse, pakkudes kõrgekvaliteedilisi diagnostikaplatvorme tervishoiutöötajate kätte, et inimesed saaksid vajalikke kriitilisi testitulemusi.Liming Bio-products Co., Ltd. püüdlused võitluses COVID-19 pandeemiaga on panustada oma tehnoloogiate, kogemuste ja teadmistega rahvusvahelistesse kogukondadesse ülemaailmse saatusekogukonna ülesehitamiseks.
Vajutage pikalt ~ Skanni ja järgige meid
Meil: sales@limingbio.com
Veebisait: https://limingbio.com
Postitusaeg: mai-01-2020
