Milline on parim meetod?
- SARS-CoV-2 infektsiooni diagnoosimise testid
Kinnitatud COVID-19 juhtumite puhul on levinud kliinilisteks sümptomiteks palavik, köha, müalgia või väsimus.Kuid need sümptomid ei ole COVID-19 ainulaadsed tunnused, kuna need sümptomid on sarnased teiste viirusega nakatunud haiguste, näiteks gripi, sümptomitega.Praegu on viiruse nukleiinhappe reaalajas PCR (rt-PCR), CT-kuvamine ja mõned hematoloogilised parameetrid peamised vahendid infektsiooni kliiniliseks diagnoosimiseks.Hiina CDC on välja töötanud ja kasutanud patsientide proovide testimiseks COVID-19 suhtes palju laboratoorseid testikomplekte.1, USA CDC2ja teised eraettevõtted.3. märtsil välja antud uudse koroonaviirushaiguse (COVID-19) diagnoosi- ja ravijuhiste Hiina uuendatud versioonis on diagnostilise kriteeriumina lisatud ka seroloogiline testimismeetod IgG/IgM antikehade test.1.Viiruse nukleiinhappe rt-PCR test on endiselt praegune standardne diagnostiline meetod COVID-19 diagnoosimiseks.
StrongStep®Uudne Coronavlrus (SARS-COV-2) Multiplex Real-Time PCR komplekt (kolme geeni tuvastamine)
Kuid need reaalajas PCR-testikomplektid, mis otsivad viiruse geneetilist materjali, näiteks nina-, suu- või pärakuproovidest, kannatavad paljude piirangute all:
1) Nendel testidel on pikk tööaeg ja nende kasutamine on keeruline;tulemuste saamiseks kulub tavaliselt keskmiselt 2–3 tundi.
2) PCR-testide tööks on vaja sertifitseeritud laboreid, kalleid seadmeid ja koolitatud tehnikuid.
3) COVID-19 rt-PCR-is on teatud arv valenegatiivseid tulemusi.See võib olla tingitud madalast SARS-CoV-2 viiruskoormusest ülemiste hingamisteede tampooniproovis (uus koroonaviirus nakatab peamiselt alumisi hingamisteid, nt kopsualveoole) ning test ei suuda tuvastada inimesi, kes on läbinud nakkuse, paranenud ja puhastasid viiruse oma kehast.
Lirong Zou et al4leidis, et suurem viiruskoormus tuvastati varsti pärast sümptomite tekkimist, suurem viiruskoormus ninas kui kurgus ning SARS-CoV-2-ga nakatunud patsientide viiruse nukleiinhapete leviku muster sarnaneb gripihaigete omaga.4ja tundub teistsugune kui SARS-CoV-2-ga nakatunud patsientidel.
Yang Pan et al5uuris kahe Pekingi patsiendi seeriaproove (kurgu tampooniproovid, röga, uriin ja väljaheide) ning leidis, et viiruskoormus kurgu tampooniproovides ja rögaproovides saavutas haripunkti umbes 5–6 päeva pärast sümptomite tekkimist, rögaproovid näitasid üldiselt kõrgemat viiruskoormust kui kurgu tampooniproovid.Nende kahe patsiendi uriini- ega väljaheiteproovides viiruse RNA-d ei tuvastatud.
PCR-test annab positiivse tulemuse ainult siis, kui viirus on endiselt olemas.Testid ei suuda tuvastada inimesi, kes läbisid infektsiooni, paranesid ja eemaldasid viiruse oma kehast.Tegelikult oli kliiniliselt diagnoositud uudse koroonaviiruse kopsupõletikuga patsientidel PCR-i suhtes positiivne vaid umbes 30–50%.Paljud uudsed koroonaviiruse kopsupõletiku patsiendid ei saa diagnoosida negatiivse nukleiinhappetesti tõttu, mistõttu nad ei saa õigeaegselt vastavat ravi.Juhiste esimesest kuni kuuenda väljaandeni, tuginedes ainult nukleiinhappetestide tulemuste diagnoosile, mis põhjustas arstidele suuri probleeme. Varaseim "vilepuhuja", dr Li Wenliang, Wuhani keskkeskuse silmaarst Haigla, on surnud.Elu jooksul tehti talle kolm nukleiinhappetesti palaviku ja köha puhul ning viimati sai ta PCR positiivse tulemuse.
Pärast ekspertide arutelu otsustati uue diagnostilise kriteeriumina suurendada seerumi testimise meetodeid.Kuigi antikehade testid, mida nimetatakse ka seroloogilisteks testideks, võivad kinnitada, kas keegi on nakatunud isegi pärast seda, kui tema immuunsüsteem on COVID-19 põhjustava viiruse puhastanud.
StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM antikehade kiirtest
IgG/IgM antikehade test aitab palju populatsioonipõhisemalt tuvastada, kellel on nakkus olnud, sest paljud juhtumid näivad levivat asümptomaatiliselt patsientidelt, keda ei ole võimalik kergesti tuvastada.Abikaasa Singapuris oli PCR-test positiivne, naise PCR-testi tulemus oli negatiivne, kuid antikehade testi tulemused näitasid, et naisel on antikehad, nagu ka tema abikaasal.
Seroloogilisi analüüse tuleb hoolikalt valideerida, et olla kindel, et need reageerivad usaldusväärselt, kuid ainult uue viiruse vastaste antikehade suhtes.Üks murekoht oli see, et tõsist ägedat respiratoorset sündroomi põhjustavate viiruste ja COVID-19 sarnasus võib põhjustada ristreaktiivsust.Xue Feng wangi välja töötatud IgG-IgM6peeti võimalikuks kasutada hoolduspunkti (POCT) testina, kuna seda saab teha voodi lähedal sõrmeotsa verega.Komplekti tundlikkus on 88,66% ja spetsiifilisus 90,63%.Siiski oli endiselt valepositiivseid ja valenegatiivseid tulemusi.
Hiina uuendatud versioonis uudse koroonaviirushaiguse (COVID-19) diagnoosi- ja ravijuhendist1, määratletakse kinnitatud juhtumid kui kahtlustatavad juhtumid, mis vastavad ühele järgmistest kriteeriumidest:
(1) Hingamisteede proovid, vere- või väljaheiteproovid osutusid SARS-CoV-2 nukleiinhappe suhtes positiivseks, kasutades rt-PCR-i;
(2) Hingamisteede, vere- või väljaheiteproovidest võetud viiruse geneetiline järjestus on väga homoloogne teadaoleva SARS-CoV-2-ga;
(3) Seerumi uued koroonaviiruse spetsiifilised IgM-antikehad ja IgG-antikehad olid positiivsed;
(4) Seerumi uus koronaviirusespetsiifiline IgG antikeha, mis muutus negatiivsest positiivseks, või koronaviirusespetsiifiline IgG antikeha taastumisperioodil on 4 korda kõrgem kui ägeda perioodi jooksul.
COVID-19 diagnoosimine ja ravi
| Juhised | Avaldatud | Kinnitatud diagnostilised kriteeriumid |
| Versioon 7 | 3 märts 2020 | ❶ PCR ❷ NGS ❸ IgM+IgG |
| 6. versioon | 18. veebruar 2020 | ❶ PCR ❷ NGS |
Viide
1. Uue koroonaviirusest põhjustatud kopsupõletiku diagnoosimise ja ravi juhised (prooviversioon 7, Hiina Rahvavabariigi riiklik tervisekomisjon, välja antud 3. märtsil 2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Kasutage 2019-nCoV tuvastamiseks teadusuuringutes ainult reaalajas RT-PCR protokolli
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapur väidab, et antikehatesti kasutati esmakordselt koroonaviiruse nakkuste jälgimiseks
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4. SARS-CoV-2 viiruskoormus nakatunud patsientide ülemiste hingamisteede proovides, 19. veebruar 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. SARS-CoV-2 viiruskoormus kliinilistes proovides Lancet Infect Dis 2020 Avaldatud veebis 24. veebruaril 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. SARS-CoV-2 kiire IgM-IgG kombineeritud antikehatesti väljatöötamine ja kliiniline rakendamine
Nakkuse diagnoos XueFeng Wang ORCID ID: 0000-0001-8854-275X
Postitusaeg: 17.03.2020
